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iPSC定向分化服务是基于iPSC的多向发育潜能,通过精确模拟体内胚胎发育信号通路,体外定向诱导分化为特定谱系的功能细胞或复杂类器官模型的专业技术平台。
类器官定向分化方面,服务涵盖脑、视网膜、心脏、肝脏、肾脏类器官等多种模型,通过时序性添加生长因子与小分子化合物,构建具有三维结构、细胞类型多样性和功能成熟度的"微型器官",用于疾病建模、药物筛选及发育机制研究。
功能细胞定向分化方面,服务可提供心肌细胞、神经元、神经祖细胞、胰腺祖细胞、造血干细胞、内皮细胞等终末功能细胞的高效诱导方案,结合纯化策略与功能成熟优化,获得高纯度、电生理活性或分泌功能成熟的细胞产品,适用于细胞治疗临床前研究、毒性测试及再生医学应用。

01iPSC源心脏类器官

↑ iPSC源心脏类器官的构建及鉴定。A. 心脏类器官的时间轴分化流程。B. 免疫荧光染色验证心脏类器官的细胞组成与区域特异性:cTnT(心肌肌钙蛋白T,绿色)与α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白,红色)双染显示心肌细胞与平滑肌细胞的共存;cTnT与WT1(Wilms肿瘤蛋白1,红色)共定位揭示心外膜样细胞的存在;Vimentin(波形蛋白,绿色)染色则标记了间充质细胞成分。

02iPSC源中脑类器官

↑ iPSC源中脑类器官的构建及鉴定。A. 中脑类器官的时间轴分化流程。B. 免疫荧光染色验证类器官的细胞组成与区域特异性,Ki67(红色,增殖标志)与NeuN(绿色,成熟神经元标志)共染显示活跃的神经发生;TH(酪氨酸羟化酶,红色,多巴胺能神经元标志)与Tuj1(绿色,早期神经元标志)共定位表明多巴胺能神经元的产生;TH与GIRK2(绿色,中脑特异性钾通道)双阳性进一步证实中脑多巴胺能神经元的区域身份。C. 定量检测了类器官培养上清中的多巴胺分泌水平。D. I部分显示神经祖细胞从D0的iPSC经D6、D15逐渐获得神经上皮形态;II部分呈现多巴胺能神经元分化过程中细胞形态从D19到D58的成熟变化;III部分通过TH与DAPI核染鉴定了终末分化细胞中多巴胺能神经元的纯度与分布。

03iPSC源肝脏类器官

↑ iPSC源肝脏类器官的构建及鉴定。A. 肝脏类器官的四阶段分化时间轴。B. HE染色与免疫荧光对比展示了HM(生长培养基)组与DM(分化培养基)组形成的类器官差异。DM组AFP(甲胎蛋白,红色,肝祖细胞标志)与ALB(白蛋白,绿色,成熟肝细胞标志)共表达,且存在CK7(角蛋白7,蓝色,胆管细胞标志)阳性的胆管样结构,以及SOX9(红色,干细胞/胆管标志)与CYP3A4(红色,细胞色素P450酶,成熟肝细胞功能标志)的表达,证实DM培养条件可诱导形成具有肝实质细胞与胆管细胞双谱系的成熟肝类器官。C. 定量比较了HM与DM组的肝功能指标,DM组在ALB(白蛋白分泌)、AAT(α-1抗胰蛋白酶分泌)、胆汁酸合成及CYP3A4酶活性四项关键肝功能指标上均显著高于HM组。

04iPSC源脊髓类器官

↑ iPSC源脊髓类器官的构建及鉴定。A. 脊髓类器官的时间轴分化流程。B. 通过免疫荧光染色验证脊髓类器官的细胞组成与功能成熟:D15时NEUN(绿色,成熟神经元标志)与PAX6(红色,神经前体/脊髓背侧标志)共染显示早期神经发生与区域化特征;D60时GAD1(绿色,GABA能抑制性神经元标志)与VGLUT1(红色,谷氨酸能兴奋性神经元标志)的双阳性表明类器官内形成了功能性的兴奋性与抑制性神经元网络,具备脊髓特有的神经环路组成。

05iPSC源血管类器官

↑ iPSC源血管类器官的构建及鉴定。A. 血管类器官的五阶段分化时间轴。B. 通过免疫荧光染色验证血管类器官的细胞外基质与血管结构组成:上图Col IV(IV型胶原,绿色)染色显示丰富的血管基底膜网络,提示血管结构的成熟与稳定性;下图Merge图呈现CD31(红色,血管内皮细胞标志)与PDGFRβ(绿色,周细胞标志)的双色共染,清晰展示血管内皮细胞与周细胞紧密包裹形成具有管腔结构的成熟血管网络,重现了原生血管中内皮-周细胞的相互作用与解剖结构,证实该血管类器官具备完整的血-组织屏障功能基础。

06iPSC源胰岛类器官

↑ iPSC源胰岛类器官的构建及鉴定。A. 胰岛类器官的五阶段分化时间轴。B. 通过免疫荧光染色验证胰岛类器官的细胞组成与功能成熟:上图INS(胰岛素,绿色)与SOX2(红色,干细胞标志)共染显示成熟胰岛无iPSC残留;下图INS(胰岛素,绿色)与GCG(胰高血糖素,红色)的双阳性表明类器官内同时存在β细胞与α细胞,重现了原生胰岛的内分泌细胞多样性,证实该胰岛类器官具备葡萄糖感应与激素分泌的功能基础,为糖尿病疾病建模、药物筛选及细胞替代治疗提供了重要的体外模型与潜在细胞来源。

07iPSC源内耳类器官

↑ iPSC源内耳类器官的构建及鉴定。A. 内耳类器官的三阶段分化时间轴。B. 免疫荧光染色验证内耳类器官的细胞组成与区域特异性:Jag1(绿色)与E-CAD(红色,上皮钙黏蛋白)共染标记耳囊阶段祖细胞,显示早期耳泡上皮结构;ANXA4(绿色)与MYO7A(红色)双阳性标记毛细胞,呈现典型的感觉上皮细胞形态;PROX1(绿色)与MAP2(红色)共染标记听觉神经元,显示神经纤维投射结构。C. AAV(腺相关病毒)病毒感染实验,绿色荧光显示病毒成功感染内耳类器官并在细胞内高效表达。

08iPSC源功能细胞

hPSC肾祖细胞
hPSC心肌前体细胞
hPSC心肌细胞
hPSC多巴胺能祖细胞

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